探测应答调控蛋白PhoBNF20D自由态中存在的Pre-Active构象
【摘要】 PhoB是PhoR/PhoB双组分信号转导系统（TCS）中的应答调控蛋白，来自大肠杆菌，可以参与环境中自由Pi的调控应答.PhoB拥有保守的磷酸化位点D53，当Mg2+存在时，会变成活性构象，但是其中的机理尚不清楚.目前已经有报道指出，自由态的应答调控蛋白存在少量的活性构象，而且它们和蛋白的激活过程相关，但是这种活性构象一般不稳定，很难观测到.本文以PhoBNF20D作为模型，1H-15NHSQC和19FNMR谱图显示，自由态PhoBNF20D在可以稳定这种活性构象，而且Mg2+可以促进非活性构象到活性构象之间的转化，在F20D形成完全的活性构象.同时我们利用Carr-Purcell-Meiboom-Gill（CPMG）弛豫弥溶液中存在pre-active构象，BeF3BeF3存在的情况下可以使PhoBN散实验证明了PhoBNF20D存在两态交换.;活性构象;核磁共振（NMR）;应答调控蛋白;双组分信号转导系统（TCS）
