蓝细菌光敏色素Alr1966GAF2及其突变体的表达与光化学性质研究
【摘要】 采用PCR技术从鱼腥藻(Anabaenasp.PCC7120)中扩增蓝细菌光敏色素基因片段alr1966gaf2ꎬ将alr1966gaf2插入到pET~30a(+)载体中ꎬ构建表达质粒pET~alr1966gaf2ꎮ最后将Alr1966GAF2与HO1、PcyA在E.coliBL21(DE3)中共表达获得色素蛋白Alr1966GAF2ꎬ并对该蛋白的光化学性质进行分析ꎮ结果显示ꎬ色素蛋白Alr1966GAF2结合色素为藻蓝胆素(phycoerythrobilinꎬPCB)或藻紫胆素(phycoviolobilinꎬPVB)ꎬ在3种不同吸收态15Z~P428nm、中间态和15E~P514nm之间具有顺序可逆光效应ꎮ通过定点突变技术将DXCF基序中的保守性Cys突变为Alaꎬ获得了突变体Alr1966GAF2(C72A)ꎮ将Alr1966GAF2(C72A)与HO1、PcyA共表达ꎬ获得色素蛋白Alr1966GAF2(C72A)ꎮ研究结果表明Alr1966GA
