抗α毒素1D5单抗ScFv基因表达菌株生物学活性的研究
【摘要】 为研究抗A型魏氏梭菌a毒素ScFv蛋目的生物学功能，利用PCR技术克隆抗a毒素1D5单抗的ScFu基因，构建含ScFu基因表达质粒pH()G-lD5的重组表达菌株XL1-BLUE(PH()G-1D5)O酶切鉴定和序列分析证实构建的PHOG-1D5重组表达质粒含有ScFp基因，且基因序列和阅读框架正确。ELISA检测结果表明在重组菌株XL1-BLUE(PHOG-1D5)培养上清和细胞周质中均检测到目的蛋白。SD&PAGE分析表明目的蛋白表达量占菌体总蛋白相对含量的29.2%。同时对ScFv蛋白生物学活性进行检测，结果表明其能中和a毒素的卵磷脂酶活性且能够对致死性腹腔攻击a毒素的小鼠产生良好的被动保护作用•从而为临床治疗a毒素中毒奠定了坚实基础。
