非小细胞肺癌中反义长链非编码RNARAB11B⁃AS1的表达及临床意义
【摘要】 目的探究非小细胞肺癌（平及其临床意义。方法选取象，将术中所得癌组织作为试验组，并取癌旁（距肿瘤边缘>）病人癌组织中反义长链非编码月至年年lncRNARAB11B⁃AS1CR0.74NSCLCNSCLC）检测后因素;分析lncRNARAB11B⁃AS11.35±0.41表达情况;分析表达情况对）;）（P<）明显高于对照组（巴结转移、远处转移和疾病分期有关（P<、预后的独立危险因素（HR=2.6924RNARAB11B⁃AS1月在湖南省直中医医院进行手术切除的320172cmlncRNARAB11B⁃AS1NSCLCNSCLCCox95%2.931.83~3.96，CI:）;、病人生存情况的影响。结果试验组病人癌组织中回归分析显示，NSCLClncRNARAB11B⁃AS1lncRNARAB11B⁃AS11.67~5.131.58~4.620.0559.09%、、）（P<0.0010.052.7028.30%（NSCLClncRNARAB11B⁃AS1PCRNSCLC97Cox）的表达水病人作为研究对例（RT⁃qP⁃2.61±的预表达（表达水平与病理类型、分化程度、淋表达、远处转移和疾病分期均是影响，均P<）。结论lncRNARAB11B⁃AS1lncRNARAB11B⁃AS10.05）;NSCLC在的治疗提）组织作为对照组。采用实时荧光定量逆转录回归分析影响病理参数的关系;lncRNARAB11B⁃AS1与高表达病人术后个月的总生存率（）明显低于低表达病人（病人癌组织中表达上调，其表达水平与病人临床病理特征有关，且与病人的预后状况密切相关，可为供参考。关键词:癌，非小细胞肺;RNA，长链非编码;RNA，反义;RNARAB11B⁃AS1;预后;实时聚合酶链反应ExpressionandclinicalsignificanceoflncRNARAB11B⁃AS1innon⁃smallcelllungcancerWANGLiuXIONGJiangjunHUANGPeizhi，，AuthorAffiliation:DepartmentofClinicalLaboratory，TheFirstAffiliatedHospitalofHunanCollegeofTraditionalChineseMedicine（HunanProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicine），Zhuzhou，Hunan，China412000，（）（，）（）（），NSCLCRT⁃qPCRlncRNARAB11B⁃AS1andtheadjacenttissuewassignificantlyhigherthanthatinthecontrolgroupAbstract:ObjectiveToinvestigatetheexpressionofantisenselongnon⁃codingRNARAB11B⁃AS1inanditsclinicalsignificance.MethodsNinety⁃sevenpatientscancertissuesofpatientswithnon⁃smallcelllungcancerwhounderwentsurgicalresectioninHunanProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicinefromSeptember2014toMarch2017wereselected.Theresectedcancertissuewastakenastheexperimentalgroup2cmfromtheedgeofofthesamepatientwastakenasthecontrolgroup.TheexpressionoflncRNARAB11B⁃AS1wasdetectedbyquantitativethetumorreal⁃timereversetranscriptionPCRtherelationshipbetweenlncRNARAB11B⁃AS1andpathologicalparametersofCoxregressionanalysiswasusedtoanalyzetheprognosticfactorsofNSCLCNSCLCwasanalyzedandtheeffectoflncRNARAB11B⁃AS1expressiononthesurvivalofNSCLCpatientswasanalyzed.ResultsTheexpressionoflncRNARAB11B⁃AS1inthe0.0012.61±0.74experimentalgroup.TheexpressionleveloflncRNARAB11B⁃AS1inNSCLCpatientswascorrelatedwithpathologicaltypedis⁃lymphnodemetastasispathologicaltype.CoxregressionanalysisoftheexpressionoflncRNARAB11B⁃AS1tantmetastasisanddiseasestagedistantmetastasisanddiseasestageshowedthattheexpressionoflncRNARAB11B⁃differentiationdegreeAS12.692.7095%1.83⁃3.961.58⁃4.62.The24⁃monthsurvivalcurveofNSCLCpatientsshowedthatoverallsurvivalrateofpa⁃CI:wassignificantlylowerthanthatofpatientswithlowexpressionofln⁃tientswithhighexpressionoflncRNARAB11B⁃AS128.30%cRNARAB11B⁃AS1.ConclusionsTheexpressionoflncRNARAB11B⁃AS1isup⁃regulatedinNSCLCcan⁃certissues.ItsexpressionlevelisrelatedtopathologicaltypedifferentiationdegreedistantmetastasisanddiseasestageReal⁃antisense，Keywords:timepolymerasechainreaction0.05lymphnodemetastasis1.67⁃5.1359.09%andiscloselyrelatedtotheprognosisofNSCLCpatientslongnoncodingCarcinomadistantmetastasisanddiseasestagewereindependentriskfactorsfortheprognosisofNSCLCwhichcanprovidereferenceforthetreatmentofNSCLC.RNAlymphnodemetastasisRNARAB11B⁃AS1differentiationdegree）（P），与病理类型、分化程度、淋巴结转移、远处转移和疾病分期有关（P<2.3癌组织中lncRNARAB11B⁃AS1表达与NSCLC病人预后的关系绘制病人NSCLC）。见表0.059712.61lncRNARAB11B⁃AS1。例、[1⁃24⁃5（，（，，5]。cerRNARNA，进展期病人）约占肺癌的lncRNAlncRNA3]。寻找治疗NSCLC15%non⁃codingRNARNARAB11B⁃AS1longnon⁃codingRNA肺癌是最为常见的恶性肿瘤，其发病率和死亡率均居全球肿瘤首位，严重危害人类的生命健康[]。肺癌的发病机制尚未完全明确，可能与环境污染、吸烟、既往肺部慢性感染、电离辐射和遗传等因素有关。非小细胞肺癌（non⁃smallcelllungcan⁃85%NSCLC90%ncRNA年生存率仅为的新途径，探寻有效的基因治疗靶点是目前亟须解决的问题。全基的基因被转录为非因组分析显示，人体内超过编码）。大量研究表明，长链非编码）在细胞增殖、分化和凋亡等多种生物学行为中发挥作用，并在多种肿瘤中异常表达，在肿瘤的发生发展中发挥抑癌或促癌作用[可通过表观6遗传、转录及转录后多种途径调控基因表达[]。反lncRNARAB11B⁃AS1义长链非编码lncRNAlncRNANSCLClncRNARAB11B⁃AS1种反义研究发现，一些特定的常，与然而报道，本研究将通过检测）是一，能通过不同机制调控基因的表达。中表达异7发生发展、转移及预后有密切联系[]。lncRNA中的作用鲜有RAB11BantisenseRNARAB11B⁃AS1NSCLC1资料与方法1.1一般资料选取湖南省直中医医院行手术治疗的其中男201739NSCLS9757.31±9.86/504728//4354Ⅰ~Ⅱ60/37月于病人，）岁，范围为例，淋巴结转移有例。试验组为病人的癌组织，对照组则选取同一病人的癌旁组织（距肿瘤边缘>期例例，远处转移有的表达及与预后的关系，以期为longnon⁃coding的治疗和预后提供依据。34~79/NSCLCNSCLCNSCLC/Ⅲ~Ⅳ岁。无:例，年龄（癌组织中20142cm/69无:月至期:女:（年例例，在在年例例/①）。经病理确认为③②;入院前3肝、肾、心脏等功能不良者;临床病理资料完整。排除标同时患有其他纳入标准:①个月未行放、化疗;准:恶性肿瘤者;拒绝参与研究者。③49721NSCLC20195641月例年，从术后第病人中共存活对所有病人随访天起，随访日日，无失访病例，统计随访期间例，死例。本研究符合《世界医学协会赫尔辛基宣期截至年的生存人数。亡言》相关要求，病人及其近亲属均知情且同意。1.2主要仪器与试剂实时荧光定量tativeReal⁃timePCRRT⁃PCRQuanti⁃PCRT100TitanOneTubeSigma⁃Al⁃）仪（型号乐生命医学产品（上海）有限公司;qPCR11939823001（），购于伯，试剂盒（货号），购于NSCLC②12484··97表1非小细胞肺癌RAB11B⁃AS1临床病理参数年龄60岁≥60<岁性别男女吸烟情况是否病理类型腺癌鳞癌其他分化程度中高分化低分化淋巴结转移是否远处转移有无疾病分期Ⅰ~Ⅱ期Ⅲ~Ⅳ期例数4354544352455433104156603728694750高表达（n=203329243023381141736381521321934低表达（n=2321251922221622624202222737281612.3000.0024.9740.0264.9790.0296.5840.0107.4320.0060.3150.575<（）。152921323661肿瘤直径41/97个月的生存曲线，其中生存术后率为组术后lncRNARAB11B⁃AS13cm≥3cm1~2442.27%213.401~17.54226/4459.09%log⁃rank2.4影响NSCLC病人预后的危险因素分析单因素分析显示，病理类型、分化程度、疾病分期、淋巴4128.30%15/53217.595~21.4510.002例，总生存高表达CI:年总生存率为，两组比较;低表达组术后），年总生存率为（值为9.27295%95%。见图，P=CI:），1。（表达（高表达vs.低表达）变量lncRNARAB11B⁃AS1病理类型（腺癌vs.鳞癌及其他）分化程度（低分化vs.中高分化）淋巴结转移（是vs.否）远处转移（有vs.无）期vs.疾病分期（Ⅲ~ⅣⅠ~Ⅱ期）97置信区间单因素分析表2非小细胞肺癌病人95%1.67~3.821.14~3.051.48~5.311.63~5.492.15~6.342.39~5.68HR值2.521.862.802.953.693.68AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2020Dec2412，（）安徽医药例癌组织中反义长链非编码表达与临床病理特征的关系lncRNARAB11B⁃AS153）/例RNAP值0.15144）χ值22.0590.0430.8360.4220.516图1非小细胞肺癌9795%2。RNARAB11B⁃AS124例癌组织反义长链非编码表达个月生存曲线lncRNARAB11B⁃AS1结转移、响NSCLClncRNARAB11B⁃AS12.932.690.051.67~5.13表达及远处转移是影病人预后的危险因素。多因素分析显示，表达、远处转移和疾病分期CI:、，、）均是影响病人预后的1.83~3.96NSCLC、、，均P<1.58~4.622.70（HR=独立危险因素。见表②①NSCLCNSCLClncRNAlncRNA主要通过以下途径参与细胞调控:3讨论NSCLC8NSCLC多数病人确诊时处于晚期[]。病人常伴随淋巴结转移和远处转移，疗晚期9效不佳[]。随着科技的进步和分子生物技术的发展，分子靶向治疗取得一定进展，但发病机制尚10未明确，目前仍缺乏有效的诊断及预后判断指标[]。不具有编码蛋白功能，但可以参与细胞的多种生物学行为，在人体内发挥重要作用。影响目与的基因启动子转录;与目的蛋白结合目的基因转录本形成互补双链;11改变目的蛋白在细胞中的定位[]。影响其活性;在肺癌的发生发展中起越来越多研究表明，在肺重要作用[腺癌细胞系中均呈高表达，且其异常表达可促进肺腺癌癌细胞增殖和侵袭。可增强）蛋白的表达，从而促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，并抑制细胞凋亡。15等[]研究表明，长链非编码凋亡抑制分子lncRNA14SPC⁃A1]发现，等[、H23RNASNHG7lncRNARMRP12⁃13A546FAIM2H1299SheFasMengRNA活性;聚合酶Ⅱ③④⑤影响]。2（、和例的预后影响因素分析P值0.0000.0000.0010.0050.0020.000HR值2.691.401.651.432.702.93置信区间多因素分析95%1.83~3.960.67~2.910.86~3.180.75~2.731.58~4.621.67~5.13P值0.0000.1060.2140.1680.0130.009100500102030*K *(%P=D=D5含有分为安徽医药lncRNA根据位置及转录方向，可将双向、正义、反义、基因间和内含子m7GPPPNlncRNAAnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2020DeclncRNAlncRNA类:165⁃3]。反义lncRNA`核酸外切亚细胞酶，比其他17Wu]。反定位相对自由，其发挥作用的机制更加广泛[18NSCLC]研义等[究发现，长链非编码癌组织中表达下调，且与疾病分期和淋巴结转移有关，细胞的正在受到人们的广泛关注。在结构，可躲避更稳定，并且反义RNAGAS5⁃AS1过表达能够抑制lncRNA`567[]，，[]，，，[][[]孟春柳，徐利明，魏佳，等[]张亚琛，梁迪，靳晶，等][中国肺癌杂志，]王丹，沙岩，吴言，等[[]黄亚洲，刘叶文，王玲玲，等::·）:J，（，，[（，，][98）（，）:1224，].Cell2018WANGDWANGJJ2485·1723taldissectionoflongnoncodingRNAs393⁃407.etal.Longnon⁃codingRNAintheCHIY2019.Cells1015.DOIpathogenesisofcancers10.3390/cells8091015.HUANGFetal.RolesandregulationofLIMLJWONGSYS.CancerlongnoncodingRNAsinhepatocellularcarcinoma79202019Resetal.TheuseoflncRNAanalysisYINDDZHANGCGforstratificationmanagementofprognosticriskinpatientswithNSCLC115⁃119..EurRevMedPharmacolSciJetal.Establishmentofanadjust⁃DINGLINXXedprognosisanalysismodelforinitiallydiagnosednon⁃small⁃celllungcancerwithbrainmetastasesfromsunyat⁃senuniversitycan⁃cercentere179⁃e186.DOI10.1016/j.cllc.2016.12.016..5131⁃5139.SUNSY.ClinLungCancerWANGFMASX20172017（，2118）:）:）:13，[]，，[]，，（，，，[]，，（JJ..J，，，，，（，]，，，，:（，，，（，][，，]（（，][2性[）:）:）:）:46121118，[，]20192016214生物技术，的研究进展）:，中国肿瘤临床，TANGC肺癌中，（的表达及其与预后的相关同转移部位预后意义的比较[晚期小细胞肺癌和非小细胞肺癌不）:JSHIHT非小细胞肺癌相关，141⁃148..2018.282018SUNY211101⁃1106.etal.InfluenceofsurveillanceREDDYJPPET/CTondetectionofearlyrecurrencefollowingdefinitiveradia⁃JtioninstageⅢnon⁃smallcelllungcancer.ClinLungCancer2017lncRNAJ.J43⁃49.1LncRNA387⁃391.etal.Comprehensiveanalysisofln⁃.ClinLabetal.LncRNA⁃RMRPactsasanonco⁃.PLoSOnee0164845.10.1371/journal.pone.0164845.etal.lncRNA⁃SNHG7promotesthemigrationandinvasionandinhibitsapoptosisof.Oncolo⁃2016LIWXCHENRcRNAandmRNAexpressionprofilesinlungcancer2017313⁃320.263LIYRENMMENGQgeneinlungcancerJ/OLDOISHEKZHOUHHUANGJproliferationlungcancercellsbyenhancingtheFAIM2expressiongyReportsHuR4342018WANGSXUYetal.Upregulationoflongnon⁃codingRNAHIF1⁃α⁃anti⁃sense1inducedbytransforminggrowthfactor⁃β⁃mediatedtargetingofsirtuin1promotesosteoblasticdifferentia⁃tionofhumanbonemarrowstromalcells20157233⁃7238.125WUYetal.Downregulationofthelongnoncod⁃LYUHingRNAGAS5⁃AS1contributestotumormetastasisinnon⁃smallcelllungcancer2673⁃2680.RIP⁃Seq.细胞中国生物化学与分子生物学5.lncRNAsLIUH31093.J.SciRep.LncRNARAB11B⁃AS1222017JJHepG2蛋白结合的，417⁃426.TANGC.MolMedRepCHENZetal.Longnon⁃codingRNARAB11B⁃AS1preventsosteosarcomadevelopmentandprogressionviaitsnaturalantisensetranscriptRAB11B9422019⁃09⁃1620182019⁃11⁃1526770⁃26786.在胃癌组织中的表（.YANGY.Oncotarget临床肿瘤学杂志，592⁃596.利用[]中与报，）:，）:，技术鉴定201636）:）:）:76[]，，（（，[]，，，，[]，（，，，，:，，JJJ（收稿日期:，修回日期:）（8[]10[]9111213[]14[]15[]1617[]18[]1920[]]冯丽萍，余盈，李跃]，达及临床意义[LIUZ]，[[⁃间质转化，发挥抑癌作用。lncRNAGAS5⁃AS1AS11022bpRAS上皮是lncRNARAB11B⁃3lncRNARAB11B⁃AS1NSCLC19q13.2癌基因家族成员，定位于处，长19]研究表明，胃个外显子。冯丽萍等[lncRNARAB11B⁃表达上调，且与病人lncRNA20等[]发现，Chen在骨肉瘤中组织中表达下调，能够抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。目前，对于，有在肿瘤疾病中的作用研究较少，在中的表达情况及作用未见报道。NSCLC病人癌组织中的表达水平，结果显示lncRNAlncRNA癌组织中预后密切相关。AS1RAB11B⁃AS1NSCLCRAB11B⁃AS1RAB11B⁃AS1NSCLCⅢ~ⅣⅠ~Ⅱ本研究检查期病人期病人，提示lncRNARAB11B⁃AS1表达在癌组织中明显高于癌旁组织，病人癌组织中腺癌、低分化、淋巴结转移、远处转移、表达水平明显高于鳞癌及其他、中高分化、无淋巴转移、无远处转移、表达可能影响的发生及病程进展;lncRNARAB11B⁃AS1Kaplan⁃ln⁃MeiercRNARAB11B⁃AS1NSCLClncRNARAB11B⁃AS159.09%NSCLCNSCLClncRNARAB11B⁃AS1存率;达、处转移和疾病分期均是影响危险因素，提示下调高），提示病人术后生表预后的独立可能对提28.30%CoxlncRNARAB11B⁃AS1病人的术后生存率有一定帮助。）低于低表达组（回归分析显示，NSCLC高表达组的曲线显示，高表达影响生存率（lncRNARAB11B⁃AS1综上所述，NSCLC病人癌组织中上调，其表达与病人临床病例特征有关，且与的治疗提供参考。病人的预后密切相关，可为NSCLCNSCLC在[]周清华，范亚光，王颖，等123[][]4[]J][，（）:BRAYF.CACancerJClini，中国肺癌低剂量螺旋参考文献etal.GlobalcancerstatisticsSIEGELRLTORRELA20156522012.，，，2018212018etal.Clinicopathologicalsignifi⁃CHENXQcanceofoestrogenreceptorexpressioninnon⁃smallcelllungcan⁃cer51⁃58.MENDELLJT.Functionalclassificationandexperimen⁃KOPPFJZHENGLX201787⁃108.CT67⁃75.2.LIZY45中国肺癌杂志，，.JIntMedRes年版）[，筛查指南）:）:1]，（，，，（[]J.（，，
