红梨实时荧光定量PCR内参基因的筛选

【摘要】 红梨(Pyruspyrifolia)果皮花青苷的合成积累是影响红梨果实着色的关键因素,其生物合成由各步酶促反应基因调控,筛选出稳定可靠的内参基因对于研究红梨果实着色关键基因及其调控机制具有重要意义。本研究旨在筛选红梨的不同品种(早白蜜,中熟32,云红梨1号),在不同生长发育时期(幼果期,缓慢生长期,快速生长期,成熟期)和不同遮光处理(自然光照,部分遮光及完全遮光)条件下均稳定表达的内参基因,以用于qRT-PCR分析。选取红梨果皮为实验材料,以梨树(Pyruscommunis)中常见的6个管家基因-β-肌动蛋白基因(β-actin,ACT)、18S核糖体RNA基因(18SribosomalRNA,18SrRNA)、甘油醛三磷酸脱氢酶基因(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase,GAPDH)、组蛋白基因(histone,His)、转录延伸因子基因(elongationfactor1α,EF-1α)及α微管蛋白基因(α-tubulin,TUB)作为候选内参基因,分别进行qRT-PCR扩增效率、内参基因稳定性参数及不同样品中相对表达量分析。以BIO-RA