瘤背石磺FMRFamide基因的克隆、分析及其在炎症刺激下的表达变化
【摘要】 该文研究了瘤背石磺(Onchidiumreevesii)在炎症刺激后体内FMRFamide基因的表达水平变化，以及FM-RFamide多肽保持其自身稳态的分子机制。以瘤背石磺转录组中FMRFamide基因片段为基础，通过RACE(Rapid-amplificationofcDNAends)技术克隆得到该基因cDNA的全长为2618bp，开放阅读框(Openreadingframe,ORF)为882bp，编码293个氨基酸，系统进化树显示该基因与静水椎实螺(Lymnaeastagnalis)FMRFam-ide基因的亲缘关系最近，这和传统形态学分类相吻合。实时荧光定量结果显示FMRFamide基因在瘤背石磺的不同组织中均有表达，但在神经节部位的相对表达量极显著高于皮肤、腹足、肝胰腺、血细胞、性腺和肌肉组织(P<0.01)。免疫组织化学验证了FMRFamide多肽在组织中与mRNA分布的一致性。炎症刺激实验结果表明，注射脂多糖(LPS)后，实验组神经节、肝胰腺、血细胞和皮肤中FMRFamide基因的mRNA表达水平显著高于对照组(P
