凡纳滨对虾微粒体谷胱甘肽硫转移酶3基因克隆及其功能分析

【摘要】 目的]明确凡纳滨对虾微粒体谷胱甘肽硫转移酶3(LvMGST3)在机体抗逆境胁迫与抵御病原体侵染过程中的功能作用,为有效提高对虾的抗胁迫能力和抗病力提供理论依据。[方法]采用RACE克隆LvMGST3基因cDNA序列,以EditSeq、ExPASy、SignalP5.0、TMHMM2.0、ClustalX和MEGA6.0等在线软件进行生物信息学分析,再应用半定量PCR进行组织表达量分析。凡纳滨对虾分别进行氨氮胁迫(20.00mg/L)及脂多糖(LPS,8μg/g)刺激后,采用实时荧光定量PCR检测分析LvMGST3基因的表达响应情况。[结果]LvMGST3基因cDNA序列全长826bp,包含85bp的5'端非编码区(5'-UTR)、321bp的3'端非编码区(3'-UTR)和420bp的开放阅读框(ORF),在ploy(A)尾前端15个核苷酸处存在加尾信号AATAAA。LvMGST3基因编码139个氨基酸残基,包含MGST3亚家族共有的保守结构域FNCX1QRX2H,此序列为FNCYQRAH。LvMGST3蛋白分子量为15.53kD,理论等电点(pI)