鸡NLRX1表达的细胞定位及其siRNA干扰效果的研究

【摘要】 NLRX1(NLRfamilymemberX1)是细胞内模式识别受体NLRs家族中重要成员之一,在炎症反应和抗病毒等天然免疫中主要发挥负调控作用。为了解鸡NLRX1(chNLRX1)分子的特征及其生物学功能,本研究采用cDNA末端快速克隆(RACE)技术,从鸡肺脏组织中克隆了chNLRX1基因的cDNA序列,其最长开放阅读框(ORF)为2970bp,编码989个氨基酸,含有较为保守的结构域,分子构象分析显示chNLRX1在空间结构上更接近于鱼类NLRX1;将chNLRX1真核表达质粒转染HEK293T细胞和鸡DF-1细胞,显示chNLRX1主要定位于细胞质内的线粒体区;以腺病毒介导RNAi干扰chNLRX1表达,采用荧光显微镜观察和westernblot方法筛选出干扰效率相对较高的siRNA(sh-NLRX1-2)。上述结果为进一步研究chNLRX1的生物学功能奠定基础。