PK-15细胞的TPL2基因敲除有利于口蹄疫病毒和塞内卡病毒复制

【摘要】 旨在构建TPL2(MAP3K8/COT)基因敲除PK-15细胞系PK-15-TPL2-/-,评估该基因敲除前后对口蹄复制的影响及产生影响的原因为研究在病毒感染过程中的作用机制疫病毒(FMDV)和塞内卡病毒(SVA),TPL2产量指明方向。SVA标签的慢病毒表达载体提供良好的生物材料也为疫苗生产过程中进一步提升,FMDV和的单向导RNA(sgRNA),sgRNA合成并将其插入到含有GFP毒表达质粒包装慢病毒并感染,细胞系中TPL2的DNA感染构建好的细胞系SVA胞中的复制水平序列细胞通过流式细胞仪分选出已被转入,PK-15通过蛋白质印迹,利用,(Westernblot)和IFA、RT-qPCR、Westernblot方法检测细胞系中TCID50评估TPL2和FMDVsgRNA在此基础上通过测定干扰素,IFNPK-15-TPL2-/-细胞中干扰素途径的激活状态构