菜粉蝶HSP20基因的克隆及温度胁迫下表达分析
【摘要】 目的]克隆分析菜粉蝶（Pierisrapae）热激蛋白20基因（HSP20），并检测其在温度胁迫下的表达情况，为探析菜粉蝶适应温度胁迫机制提供参考。[方法]以菜粉蝶为试验材料，采用RT-PCR和RACE克隆获得菜粉蝶HSP20基因cDNA全长，并通过生物学软件分析其序列，明确其基因结构特征和亲缘关系;采用实时荧光定量PCR检测菜粉蝶HSP20基因在低温（-20~0℃）和高温（5~45℃）胁迫下的表达响应。[结果]菜粉蝶HSP20基因全长725bp，5'-端非编码区105bp，3'-端非编码区109bp，开放阅读框531bp，编码176个氨基酸，预测蛋白分子量19.5kD，理论等电点6.61;其编码氨基酸序列中含有1个典型的HSP20家族结构域（位于第60~142位氨基酸）、1个α-晶体蛋白（位于第60~157位氨基酸）和1个Allatoallatostatin（位于第14~24位氨基酸）;基序列相似度分析其与二化螟、家蚕和甘蓝夜蛾HSP20蛋白氨基酸相似度较高并聚为一族。该基因随环境温度的升高或降低发生变化，在-5和40℃诱发该基因高效表达。[结论]
