大刺鳅mstn基因克隆及表达分析

【摘要】 目的]了解大刺鳅(Mastacembelusarmatus)肌肉生长抑制素(myostatin)基因mstn的序列及其在生长发育中的调控功能。[方法]利用RACE方法克隆大刺鳅mstn全长cDNA序列,采用荧光定量PCR分析其在不同组织和胚胎发育阶段的表达情况。[结果与结论]大刺鳅mstncDNA序列全长2690bp,包含200bp5′非编码区、1359bp3′非编码区和1131bp开放阅读框,编码376个氨基酸。前22个氨基酸残基为信号肽,第37~254位氨基酸残基为TGF-β前肽域,第282~376位是TGF-β结构域,具蛋白酶水解位点RARR和C端生物活性区的9个保守半胱氨酸残基。系统发育分析表明,大刺鳅MSTN氨基酸序列与合鳃目、鲈形目鱼类同源性较高,与哺乳动物、鸟类、爬行类、两栖类同源性较低。实时定量PCR分析表明,大刺鳅mstn基因在各组织中均有表达,肌肉中表达量最高,眼、脑次之,鳃表达量最低;大刺鳅胚胎发育的各阶段mstn基因均有表达