表面脱乙酰化甲壳素颗粒固定溶菌酶及酶学性质研究
【摘要】 本研究以表面脱乙酰化甲壳素颗粒为载体，以戊二醛为交联剂，对溶菌酶进行固定化。本文利用正交试验设计，以蛋白利用率、活力回收率和保藏稳定性为指标，以半脱乙酰壳聚糖为底物，3-甲基-2-苯丙噻唑啉酮腙(MBTH)法为酶活力测定方法，优化了关键固定化参数，并考察了固定化对溶菌酶酶学性质的影响。结果表明:固定化过程中最佳脱乙酰时间(A)为25min，戊二醛浓度(B)为5%，载体活化pH(C)为5.0，在此条件下固定化的溶菌酶与游离溶菌酶相比，其表观最适pH由4.0降至3.5;最适温度由75℃升高至80℃，且在70~90℃仍保持95%活力;Km为2.69mg/mL，明显大于游离酶的1.75mg/mL;15d稳定性保持66%。因此，固定化提高了溶菌酶的热稳定性和贮藏稳定性，具有广泛的应用前景。
