末水坛紫菜蛋白源抗氧化肽的制备、分离纯化与体外抗氧化活性
【摘要】 通过单因素试验、Box-Behnken设计响应面分析法优化酸性蛋白酶水解末水坛紫菜蛋白工艺，并测定不同水解时间的酶解产物体外抗氧化活性与分子质量分布。结果表明:当水解时间4h、底物质量浓度2g/100mL、加酶量4240U/g、pH3.7、温度54℃的条件下，水解度可高达11.40%。此外，通过调节水解时间以控制水解度，探讨了水解度与酶解产物抗氧化活性的关系，发现当水解时间为4h、水解度为11.40%时，酶解产物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除活性最强，其清除DPPH自由基的半抑制率质量浓度为0.68mg/mL，分子质量小于1kDa的小分子肽占总量的73.46%。同时，采用凝胶色谱层析对末水坛紫菜酶解产物进行了分离纯化，得到末水坛紫菜抗氧化肽（Porphyrahaitanensisantioxidantpeptide，PHAP），其质量浓度为1mg/mL时对DPPH自由基的清除率为73.32%，对羟自由基的清除率为30.15%。最后通过建立H2O2诱导人肝癌He
