细胞色素c与NO相互作用的光谱研究

【摘要】 目的:为了探究NO与细胞色素c(Cytc)的结合反应过程以及其对血红素蛋白构象的影响。方法:本文采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱、圆二色等光谱法研究不同价态Cytc、不同影响因素下,Cytc直接与NO之间的结合反应,并且阐述了NO与Cytc反应的荧光猝灭机制。结果表明:NO更容易与三价铁Cytc(Cytc-Fe(III))反应。NO不仅能与蛋白质氨基酸侧链弱结合,还能与血红素铁发生紧密结合。通过荧光猝灭机制可知:NO与Cytc结合为静态猝灭,二者以静电引力等弱结合力结合,结合位点数为1。同时,受NO诱导作用,Cytc中血红素Fe-S键变弱促进NO与Cytc的紧密结合。二者结合受到NO浓度的影响。溶液中游离芳香族氨基酸均促进两者结合反应,其中Tyr促进作用最强;355nm激光照射促进NO与Cytc的结合;但有Phe、Trp残基存在时激光照射却阻碍了结合作用。NO与Cytc的结合会改变Cytc蛋白构象及周围氨基酸残基的微环境,导致肽链伸展,极性增强。意义: