蓝圆鲹黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备及其活性分析
【摘要】 以蓝圆鲹为原料,选用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶及碱性蛋白酶对其进行水解。以酶解产物黄嘌呤氧化酶(xanthineoxidase,XOD)的抑制活性为指标,通过单因素试验及正交试验确定了最佳的酶解制备条件。结果显示,最佳酶解条件为采用中性蛋白酶,加酶量0.3%(质量分数),料液比1∶2(g∶mL),pH7.0,酶解温度50℃,酶解时间6h。在此条件下,蓝圆鲹多肽(roundscadpeptides,RSPs)的XOD抑制活性为64.03%(15g/L),Fe2+结合活性为61.56%;此法获得的RSPs分子质量92.35%分布在1000Da以下;氨基酸分析表明,RSPs中与XOD抑制活性有关的疏水性氨基酸(如Ala、Val、Leu、Ile)以及与金属离子结合活性相关的氨基酸(如Glu、Asp、Arg、His)含量较高;此外,紫外光谱和红外光谱扫描结果表明,RSPs可与Fe2+发生结合反应,其与Fe2+的结合位点可能是酰胺键、氨基的N原子与羧基的O原子。
