大肠杆菌表达腺苷蛋氨酸合酶及产酶条件优化

【摘要】 腺昔蛋氨酸(adenosymethionine,SAM)是人体中重要的代谢中间体,在医疗上被广泛应用于治疗肝炎,抑郁症以及关节炎等疾病。酶法进行腺昔蛋氨酸的生产具有良好的工业前景。将来源于酿酒酵母BY4741中的腺昔蛋氨酸合酶基因(sam2)进行密码子优化后,与pET-28a(+)和pET-3b(+)进行连接获得重组质粒pET-28a(+)-sam2和pET-3b(+)-sam2,分别实现其在E.coliBL21(DE3)和E.coliRosetta(DE3)中的异源表达,结果表明,重组菌E.coliBL21/pET-28a(+)-sam2的SAM酶活较高,达到0.184U/mLo对该重组菌株进行发酵条件优化,在最优条件下,SAM合酶最高酶活为0.245U/mL,比优化前提高34%。