基于网络药理学的墨旱莲-女贞子药对“异病同治”糖尿病肾病与糖尿病视网膜病变的机制研究
【摘要】 目的]通过网络药理学的方法，研究墨旱莲-女贞子药对“异病同治”糖尿病肾病（DN）与糖尿病视网膜病变（DR）的药理作用机制，验证国医大师吕仁和教授治疗DN与DR的临床经验。[方法]利用TCMSP、TCMID和Uniprot数据库，搜集并获取墨旱莲、女贞子的化学成分及其作用靶点。利用NCBI-gene、Genecards和OMIM数据库搜集DN和DR的疾病相关靶点。通过String数据库、Cytoscape3.7.2软件、TBtools软件构建药物靶点蛋白相互作用网络，获取交集靶点。利用BioGPS数据库和Cytoscape3.7.2软件构建作用靶点-组织分布网络图，运用GO数据库和Cytoscape3.7.2软件的ClueGO插件对交集靶点进行GO和KEGG富集分析。[结果]墨旱莲-女贞子药对主要含有14个活性成分和124个潜在作用靶点，DN相关靶点2614个，DR相关靶点2587个，其中药对同时作用于DN和DR的共同靶点有63个。有11个作用靶点在胰岛、视网膜和肾脏高表达，KEGG富集分析得到共同靶点主要富集在糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路和IL-17信号通路等115条通路上，涉及对含氧化合物的反应、细胞对化学刺激的反应、对脂质的反应和细胞群增殖的调节等1686个生物过程。[结论]墨旱莲-女贞子药对可能通过调节多个靶点、多条通路和多个生物反应过程，达到对DN与DR的“异病同治”作用，为吕仁和教授的临床经验用药提供了网络药理学验证，也为今后进一步研究墨旱莲-女贞子药对的药理作用机制提供了依据。关键词:墨旱莲;女贞子;糖尿病肾病;糖尿病视网膜病变;异病同治中图分类号:R587.2文献标志码:A文章编号:1673-9043（2021）03-0374-10开放科学（资源服务）标识码（OSID）:糖尿病是一种多因素导致的糖代谢异常疾病，为23%[3]，两者分别是末期肾病和成人致盲的主要2019年全球糖尿病患病率为9.3%，预计2030年将上升到10.2%[1]，糖尿病肾病（DN）与糖尿病视网膜病变（DR）是临床常见糖尿病微血管并发症，是血糖原因。DN是由糖脂代谢障碍、氧化应激失衡、炎症因子失调和血液微循环失调等原因导致的肾小球病异常导致的肾脏病变与眼底病变。对于糖尿病患者变[4]，DR是由高血糖、炎症反应、氧化应激反应和神来说，DN发病率能达到30%~40%[2]，DR患病率约*基金项目:国家自然科学基金面上项目（81873181，81473367）;国家自然科学基金青年基金项目（81603401）;中央级公益性经保护因子等因素引起的视力逐渐减退，最终导致失明[5]。理论上，DN与DR都属于糖尿病微血管并发症，两者可能有共同的发病机制，如高糖毒性、自由基作用、多元醇代谢异常、炎症介质氧化应激及科研院所基本科研业务费专项资金资助项目（Z0659，遗传因素等，并且有研究表明，眼底检查可提示糖[6]Z0647）;北京市科技计划课题资助项目（Z121100000312006）。作者简介:王娟（1997-），女，硕士研究生在读，主要研究方向为中西医结合基础。尿病患者的肾脏病变。传统中医理论认为，肝肾同[7]源，肾为肝之体，肝为肾之用，肾的疾病往往离不开通讯作者:顾浩，E-mail:hebegu@126.com;姜淼，E-mail:肝的失调，同时，肝开窍于目，五脏六腑之精皆上注miao_jm@vip.126.com。374于目，故肝与目在生理病理上密切相关，并且目的第40卷第3期2021年6月JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine天津中医药大学学报Vol.40No.3Jun.2021生理正常离不开肾精的调养，这就提示了DN与DR1资料和方法之间的密切联系，两者之间的发生与治疗可能存在1.1墨旱莲-女贞子药对化学成分的搜集与筛选通相通的地方。目前DN与DR主要采用药物治疗和过中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP，手术治疗，但是其存在药物抵抗和术后并发症等不http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php）和中药化学成分数良反应。西医疗法联合中药治疗DN与DR在临床据库（TCMID，http://119.3.41.228:8000/tcmid/）搜索上很常见，但是大部分以单方剂为主，很少使用复关键词“墨旱莲”和“女贞子”，得到药物所含活性成方作为主要治疗药物，主要原因就是中药的有效成分相关信息，筛选符合条件的化合物作为药物有效分和药理作用机制尚不明确。成分，本研究筛选条件为口服生物利用度（OB）≥30%，国医大师吕仁和教授在临床治疗DN与DR脂水分配系数（Alogp）<5，氢键供体数（Hdon）<5，氢时，常配伍墨旱莲-女贞子对药，以滋补肝肾，明目凉血，治疗肝肾阴虚所导致的DN与DR等糖尿病并键受体数（Hacc）<10，肠上皮通透性（Caco-2）>0，类药性（DL）≥0.1，药物半衰期（HL）≥4[13]。发症，补阴以制阳亢。墨旱莲记载于《新修本草》，[8]1.2墨旱莲-女贞子药对靶点的筛选将筛选得到能够滋补肝肾，凉血止血;女贞子首载于《神农本草经》，主要功效是滋补肝肾，明目乌发，两药均具有抗的药对有效成分逐一输入TCMSP数据库，得到每个成分对应作用靶点，再利用蛋白质数据库（Uniprot，炎、抗氧化、免疫调节、治疗糖尿病等药理作用。[9-10]https://www.uniprot.org/）的UniProtKB功能，逐一录但是这一药对治疗DN、DR的具体作用机制尚不明确，因而限制了其在临床实践中的推广应用。入靶点并将物种限定为人，将所有靶点校正为官方名称（officialsymbol），即为墨旱莲-女贞子药对的作网络药理学是基于系统生物学和多向药理学用靶点。的角度，对药物治疗疾病的作用成分、作用靶点和作用通路进行解析，构建整体网络模型，从多角度深入探讨药物治疗疾病的药理作用机制，并且现在已经有许多研究证明了网络药理学方法对探索中1.3DN与DR的靶点筛选利用GeneCards数据库（http://www.genecards.org/）、NCBI-gene数据库（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene）和人类孟德尔遗传数据库OMIM（http://www.omim.org/）3种数据库，输入药治疗疾病作用机制的可靠性和准确性。Guo等[11]关键词“DiabeticNephropathy”“DiabeticRetinopathy”利用网络药理学研究了左金丸治疗肝癌的作用机查找筛选疾病相关的靶点。制，并且验证了左金丸通过PI3K-NF-κB、EGFR-MAPK1.4靶点蛋白相互作用网络构建将药对作用靶和CCND1通路对肝癌细胞的抑制作用。马林等[12]通点输入String数据库（https://string-db.org/），置信度过构建成分-靶点-通路网络模型，预测了丹七片治设置为0.9，得到药对靶点蛋白相互作用（PPI）网络疗冠心病可能是通过丝氨酶/基氨酸/蛋白激酶模型，将数据导出，输入Cytoscape3.7.2软件，进行（AKT1）、白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF）、可视化，并利用MCODECluster算法[14]，按照默认参丝裂原活化蛋白激酶（MAPK1）等关键靶点。利用网数（NodeScoreCutoff:0.2，Haircut:true，Fluff:false，络药理学从成分、靶点、通路、生物过程等方面整K-Core:2，Max.DepthfromSeed:100）对网络进行模体分析探索墨旱莲-女贞子药对“异病同治”DN与DR块划分。的作用机制，符合中医理论的整体作用特点，也为中药复方制剂的机制研究提供一种新思路新方法。1.5作用靶点与组织分布网络构建将共同靶点输入BioGPS（http://biogps.org/#goto=welcome）数据传统中医理论认为“异病同治”指不同的疾病库，以大于等于中位数的基因表达量为界限筛选出在发生发展过程中出现了相同病机，故而可以采用每个靶点基因分布的器官/组织，整理胰岛同样的方法加以治疗，墨旱莲-女贞子药对滋补肝（PancreaticIslet）、视网膜（Retina）和肾脏（Kidney）肾以治疗DN与DR符合“异病同治”的理念。本文中的表达基因，利用Cytoscape3.7.2软件构建作用利用网络药理学的方法，探索墨旱莲-女贞子药对靶点-组织分布网络图。的有效成分、关键作用靶点和通路，以明确其作用1.6基因功能和通路富集分析通过TBtools软件机制，为中药复方治疗DN与DR的药理作用研究（https://github.com/CJ-Chen/TBtools）获取墨旱莲-提供参考，以期进一步推进中医药治疗糖尿病慢性并发症的临床应用。女贞子药对、DN、DR的共同靶点，将共同靶点输入基因功能资源数据库（THEGENEONTOLOGY375第40卷第3期2021年6月JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine天津中医药大学学报Vol.40No.3Jun.2021RESOURCE，GO，http://geneontology.org/）进行基因靶点，包括TP53、AKT1、TNF、RELA、VEGFA、MAPK1/功能富集分析，将分析得到的相关性前12个结果8/14等都与DN和DR的治疗直接相关，很有可能是通过柱状图展示。墨旱莲-女贞子药对“异病同治”DN与DR的关键将共同靶点输入Cytoscape3.7.2软件插件靶点。ClueGO[15]中，计算富集结果的每个P值，并通过2.3基于网络模块化分析墨旱莲-女贞子药对治疗Bonferroni方法校正，以P<0.05为筛选条件，根据从DN与DR的靶点利用MCODE网络模块划分方小到大的顺序对P值进行排序。法，对墨旱莲-女贞子的靶点网络降维分解以便更2结果清晰明了地观察和分析网络，最后得到8个核心模2.1墨旱莲和女贞子的有效作用成分在TCMSP块，结果见OSID。其中有7个模块与DN、DR都相数据库中，根据筛选条件筛选得到符合要求的活性关，模块6中没有与DN或者DR直接相关靶点。同成分，墨旱莲有10种，女贞子有5种，详细信息见时，结果显示墨旱莲-女贞子药对“异病同治”DN与表1。DR的靶点主要分布在模块1、2、3中，对这3个模2.2构建墨旱莲-女贞子药对治疗DN与DR的靶块中的药对、DN、DR的共同靶点进行KEGG通路点网络模型通过整理得到墨旱莲的作用靶点和生物过程（BP）富集分析，得到的结果见表2。88个，女贞子的作用靶点111个，去重后得到墨旱2.4基于靶点-组织分布分析墨旱莲-女贞子的DN与莲-女贞子药对的潜在作用靶点124个，DN相关靶DR作用机制利用BioGPS数据库和Cytoscape3.7.2点2614个，DR相关靶点2587个。其中墨旱莲-女软件构建墨旱莲-女贞子药对“异病同治”DN与贞子药对与DN直接相关的靶点88个，与DR直接相DR的作用靶点-组织分布网络图，见图1。图中共有关的靶点69个，韦恩分析图见开放科学（资源服务）66个节点，130条边，其中边的粗细代表了靶点在组标识码（OSID）。利用String数据库和Cytoscape3.7.2织中的表达量大小，从图中可以看出，APP、VEGFA、软件构建的墨旱莲-女贞子靶点相互作用关系网络GSTP1、INSR、VCAM、ACHE和SELE等11个作用见OSID，节点连接度排名前20位的靶点连接靶点靶点均在胰岛、视网膜和肾脏组织中高表达，其具数目见OSID，RXRA与DN、DR的治疗不直接相体信息见图2。关，CDK1、CDKN1A、RB1、CASP8只与DN的治疗直2.5墨旱莲-女贞子药对作用于DN、DR靶点的接相关，CCNA2与DR的治疗直接相关，其他14个GO分析对墨旱莲-女贞子药对作用于DN与DR中药编号化合物相对分子质量AlogPHdonHaccOB（%）Caco-2DLHL表1墨旱莲与女贞子的活性成分信息表墨旱莲墨旱莲墨旱莲墨旱莲墨旱莲墨旱莲墨旱莲墨旱莲1金合欢素[acacetin]2紫铆素[butin]284.28272.2731，3，8，9-四氢氧基苯并呋喃[1，3，8，9-300.23tetrahydroxybenzofurano[3，2-c]chromen-6-one]43'-O-甲基原糖[3'-O-Methylorobol]5红车轴草素[Pratensein]6去甲蟛蜞菊内酯[demethylwedelolactone]7蟛蜞菊内酯[wedelolactone]300.28299.27302.25314.268（Z）-1-（2，4-二羟基苯基）-3-（3，4-二羟基苯基）272.27[prop-2-en-1-one（Z）-1-（2，4-dihydroxyphenyl）-3-（3，4-dihydroxyphenyl）prop-2-en-1-one]墨旱莲9（-）-氧化石竹烯[（-）-Caryophylleneoxide]墨旱莲、女贞子10木犀草素[luteolin]11山萘酚[kaempferol]12雌黄醇[eriodictyol]13透明碱[Lucidusculine]14DBP女贞子女贞子女贞子女贞子376220.39286.25286.25288.27401.60278.382.592.302.482.051.371.102.732.633.522.071.772.031.464.20234324340444205576677516665434.9769.9433.9457.4139.0672.1349.6083.7832.6736.1641.8871.7930.1164.540.670.300.010.450.390.040.320.101.580.190.260.170.160.800.240.210.430.270.280.430.480.170.130.250.240.240.750.1317.2516.809.6217.3117.139.179.6119.886.5115.9414.7415.8110.555.41第40卷第3期2021年6月JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine天津中医药大学学报Vol.40No.3Jun.2021表2核心模块中“异病同治”靶点的KEGG通路和BP富集分析编号KEGG通路P值生物学过程1Smallcelllungcancer8.50E-07responsetonutrientlevelsProstatecancerHepatitisBPathwaysincancerThyroidcancer8.50E-07responsetoUV1.54E-06responsetoantibiotic2.00E-06responsetosteroidhormone3.31E-06responsetodrug2Proteoglycansincancer1.04E-09reproductivestructuredevelopmentAGE-RAGEsignalingpathwayindiabeticcomplications5.22E-09regulationofcellpopulationproliferationToxoplasmosis5.83E-09mammaryglanddevelopmentKaposi`ssarcoma-associatedherpesvirusinfection5.49E-08positiveregulationofcellpopulationproliferationP值5.29E-055.29E-052.40E-042.50E-042.50E-049.46E-071.01E-051.87E-051.87E-05Pathwaysincancer6.48E-08positiveregulationofintracellularsignaltransduction2.17E-053Inflammatoryboweldisease（IBD）2.74E-07regulationofcellactivation3.21E-063.49E-06AllograftrejectionAfricantrypanosomiasis5.46E-06regulationofsignalingreceptoractivity5.46E-06positiveregulationofmulticellularorganismalprocess8.83E-06Jak-STATsignalingpathway5.46E-06regulationofcellpopulationproliferationIntestinalimmunenetworkforIgAproduction6.05E-06positiveregulationofleukocyteactivation8.83E-068.83E-06取交集，得到墨旱莲-女贞子既直接作用于DN又直接作用于DR的靶点有63个，对这63个靶点进行GO分析，发现1686个BP、68种细胞成分（CC）和136个分子功能（MF）可能与墨旱莲-女贞子药对“异病同治”DN与DR的机制相关。其中富集得到的前15个GO分析结果具体信息见图3。2.6墨旱莲-女贞子药对治疗DN与DR的KEGG通路分析通过ClueGo对墨旱莲-女贞子药对既直接作用于DN又直接作用于DR的63个靶点进行KEGG通路富集分析，得到115条通路（P>0.05），提取P值最小的前20条通路进行可视化分析，见图4，其中前10条通路详细信息见表3。3讨论3.1墨旱莲-女贞子药对治疗DN与DR的有效成分分析墨旱莲-女贞子药对治疗DN与DR包含木犀草素、金合欢素和山奈酚等14种有效成分，其中木犀草素是墨旱莲与女贞子的共同作用成分，而且关联了AKT1、INSR、MAPK1、TNF、VEGFA等关键靶点，表明木犀草素可能是墨旱莲-女贞子药对发挥协同作用的主要成分，研究发现，木犀草素能够通过降低TLR4与JNKmRNA的水平以改善2型糖尿病大鼠胰岛素的抵抗作用，可能通过增加超氧化物歧化酶（SOD）含量，激活Nrf2/HO-1通路而延缓糖尿病大鼠视网膜病变过程，而且能够明显减轻糖尿病引起的血管并发症。此外，墨旱莲的有效[16-18]成分金合欢素也能改善DN与DR患者的炎症反应377注:圆形节点代表作用靶点，三角形节点代表组织，边表示靶点在组织中的表达量大小，边越粗表明靶点在组织中的表达量越大。图1作用靶点-组织分布网络图图23个组织中同时高表达的作用靶点的相关信息柱状图第40卷第3期2021年6月JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine天津中医药大学学报Vol.40No.3Jun.2021）值Pg（l-注:横坐标代表GO分析结果名称，纵坐标表示-lg（P值）。图3墨旱莲-女贞子药对作用于DN、DR靶点的GO分析结果注:菱形节点代表通路，圆形节点代表靶点，圆形中有多个颜色则代表这个靶点存在于多条通路中。图4墨旱莲-女贞子药对治疗DN与DR的KEGG通路分析和细胞凋亡，女贞子的有效成分山奈酚能够通[19-20]VEGFA、GSTP1、INSR、TNF、AKT1、VCAM1、IL-6和过一定途径控制糖尿病患者的血糖水平。[21-23]MAPK1等靶点可能是墨旱莲-女贞子“异病同治”3.2基于KEGG富集与GO富集分析墨旱莲-女贞DN与DR的关键靶点，而且这些重要靶点大部分在子药对“异病同治”DN与DR的机制从药对的靶糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF信点-组织分布网络和靶点蛋白PPI网络可以看出，号通路、IL-17信号通路、PI3K-Akt信号通路和378第40卷第3期2021年6月JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine天津中医药大学学报Vol.40No.3Jun.2021表3前10条KEGG通路信息通路PathwaysincancerP值2.04E-24AGE-RAGEsignalingpathwayindiabeticcomplications1.79E-21Fluidshearstressandatherosclerosis1.91E-18ToxoplasmosisKaposisarcoma-associatedherpesvirusinfectionTNFsignalingpathwayHepatitisBPancreaticcancerApoptosisIL-17signalingpathway9.78E-162.89E-134.77E-135.43E-131.50E-121.17E-112.71E-11基因数相关基因12201513152011111317AKT1，BCL2，EGFR，HMOX1，IFNG，IL6，INSR，MAPK1，NOS2，NOS3，RELA，VEGFAAKT1，BCL2，BCL2L1，CASP9，CCND1，CDK4，EGFR，FASLG，IL2，IL4，IL6，INSR，MAPK1，MCL1，MET，NOS3，PIK3CG，RELA，TP53，VEGFAAKT1，BAX，BCL2，BCL2L1，CASP3，CASP7，CASP9，FASLG，JUN，MAPK1，MAPK8，MCL1，RELA，TNF，TP53CASP3，IFNG，IL4，IL6，JUN，MAPK1，MAPK14，MAPK8，MMP1，MMP9，PTGS2，RELA，TNFAKT1，CASP3，CASP7，ICAM1，IL6，JUN，MAPK1，MAPK14，MAPK8，MMP9，PTGS2，RELA，SELE，TNF，VCAM1AKT1，BAX，BCL2，CASP3，CCND1，CDK4，ICAM1，IL6，JUN，MAPK1，MAPK14，MAPK8，MMP2，NOS3，RELA，SELE，STAT1，TNF，VCAM1，VEGFACASP3，CASP7，IL10，IL6，JUN，MAPK1，MAPK14，MAPK8，NOS2，RELA，TNFIFNG，IL10，IL4，JUN，MAPK1，MAPK14，NOS2，PTGS2，RELA，STAT1，TNFAKT1，FASLG，IFNG，IL10，IL2，IL6，JUN，MAPK1，MAPK14，MAPK8，NOS2，RELA，TNFAKT1，ALOX5，BCL2，BCL2L1，CASP3，CASP9，CD40LG，IFNG，IL10，MAPK1，MAPK14，MAPK8，NOS2，PIK3CG，RELA，STAT1，TNFHIF-1信号通路中都可富集到。糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路是DN与DR发生发展过程中的重要一环，能够激活核转录因子-κB（NF-κB），刺的反应、细胞对化学刺激的反应、对脂质的反应和细胞群增殖的调节等生物过程，进而对机体的氧化应激、炎症反应、糖脂代谢等过程进行调节，以影响激血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子-β1DN与DR的病理进程。（TGF-β1）的产生，诱导单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）3.3墨旱莲-女贞子治疗DN与DR的核心模块分[24]表达，从而促使肾小球硬化、肾纤维化、炎症反应析与潜在作用靶点发现生物网络的聚类模块分发生、血栓形成和视网膜心血管生成。TNF-α是TNF信号通路中的核心基因，抑制NF-κB/TNF-α信号析是识别功能模块和预测蛋白质功能的重要方法之一，聚类结果的可视化对于揭示生物网络的结构通路的活化，可以减少促炎因子TNF-α、IL-1β的至关重要。在对模块分析结果中的3个核心模块进表达，进而对肾脏起到保护作用[25]，改善DN与DR行KEGG通路和生物过程富集分析发现，这些核心患者的炎症反应和视网膜内皮细胞凋亡。IL-17信模块中与DN、DR直接相关的靶点主要涉及肿瘤、号通路介导了炎症反应和相关的肾组织损伤与肾免疫和细胞因子传导相关通路，参与细胞应激反小球硬化[26]，抑制IL-17信号通路能够缓解DN、DR应、增殖和活化等生物过程，进一步验证了墨旱莲-的炎症反应和肾脏损伤。PI3K-Akt信号通路参与女贞子药对治疗DN与DR作用靶点对免疫系统和了高糖诱导的视网膜神经细胞凋亡过程，通过[27]细胞增殖与凋亡的影响。此外，GSK3β与MAPK8、PI3K-AKT/mTOR信号通路上调自噬，能够减轻氧JUN、AR在同一功能模块5中，而MAPK8、JUN、AR化低密度脂蛋白胆固醇（ox-LDL）诱导内皮细胞的与DN、DR的病理机制直接相关，这表明GSK3β与氧化应激损伤[28]。抑制HIF-1信号通路可以降低增DN、DR的病理作用是可能存在间接联系的，而且通殖性DR的病理性视网膜血管生成[29]，改善糖尿病过查阅文献发现，GSK3β是NF-κB介导的对TNF-α状态下肾脏肾小管上皮细胞间充质转分化及肾小的抗凋亡反应所必须的[31]，调控NF-κB信号通路和管间质纤维化[30]，从而改善DN、DR。TNF-α表达能够影响肾小球系膜的氧化应激反应墨旱莲-女贞子药对直接作用于DN和DR的和肾纤维化[32-33]，从而影响DN、DR的病理进程。XIAP63个共同靶点的GO分析结果表明，墨旱莲-女贞与CASP7、CASP9在同一功能模块7中，CYP1A1与子药对“异病同治”DN与DR的靶点主要集中在膜CYP1B1、AHR在同一功能模块9中，但是数据显示区、细胞质核周区域、膜封闭腔和胞质溶胶等细胞成分，同时影响酶结合、蛋白质结合、信号受体结合XIAP、CYP1A1与DN直接相关而不与DR直接相关。查阅文献发现，XIAP能够调节BMP信号通路以和BH3域结合等分子功能，并参与了对含氧化合物及SMAD和MAP3K7/TAK1依赖性通路[34]，从而导379第40卷第3期2021年6月JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine天津中医药大学学报Vol.40No.3Jun.2021致NF-κB和JNK活化，抑制JNK信号通路能够减少细胞凋亡，改善DR[35];CYP1A1参与NADPH依赖性电子转运途径，NADPH减少能够导致还原性谷探索墨旱莲-女贞子药对“异病同治”DN与DR的作用机制，意在从药物成分、靶点和通路层面研究中药药对的药理作用原理，但是中药在炮制及煎煮胱甘肽生成减少，从而降低细胞的抗氧化能力，加过程中可能会产生新的成分，而且机体的生理状态速细胞坏死[36]，这可能与DR的发生密切相关。这些与病理状态下的中药吸收、分布、代谢、排泄（ADME）研究表明，GSK3β、XIAP和CYP1A1可能是墨旱莲-女贞子药对“异病同治”DN与DR的潜在作用过程可能会有所不同，可能会影响药物的作用途径。而且，对于个体化的治疗数据以及数据的定量靶点，具有一定的研究价值，对后续新药研发和临化分析，对疾病的治疗具有重要意义，这就有待实床研究具有一定的启示作用。验研究和临床研究中相关数据的补充，为中药的网3.4利用网络药理学对“异病同治”理论的研究优络药理学研究提供更全面和科学的数据平台。势中医“异病同治”理论是对疾病的病机和症状4结论进行归纳总结并且在临床实践中得到了验证，但是由于现代临床状况和社会因素的影响，“异病同治”理论的病理发生机制和治疗机制均未得到充分的研究，这就限制了“异病同治”方法在临床中的应用，并且可能会错过某些疾病的良好治疗方法。网络综上所述，墨旱莲-女贞子药对“异病同治”DN与DR可能通过木犀草素、金合欢素和山奈酚等21种有效成分，作用于VEGFA、INSR、IL-6、AKT1、VACM1等关键靶点，进而调节糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路和IL-17信号通路药理学是大数据时代利用计算机技术构建跨越药等，调节机体的氧化应激、炎症反应和糖脂代谢过物、分子、细胞、组织、器官、患者和疾病种类之间的整体网络，实现对靶标、通路、生物过程的筛选和临床研究前的预测和验证，能够节省大量的科研资源程等生物反应过程，以达到对DN和DR“异病同治”的治疗作用。同时，GSK3B、XIAP和CYP1A1可能是墨旱莲-女贞子药对“异病同治”DN与DR的潜在与经费，直接得到最关键的研究思路与研究方向。作用靶点，为临床新药的研发提供了一定思路。在本研究中，利用网络药理学对墨旱莲-女贞利用网络药理学的方法，对墨旱莲-女贞子药子药对对DN与DR的“异病同治”作用进行研究，对“异病同治”DN与DR的作用机制进行了研究，结探索了DN与DR两种疾病的共同靶点、共同通路和涉及的生物过程、分子功能及细胞成分，从多方果表明不论从作用靶点还是相关通路方面，墨旱莲-女贞子药对治疗DN和DR的作用机制都十分面验证了“异病同治”理论的科学性，如共同关键靶相似，这也从网络药理学的角度进一步印证了“异点VEGFA、AKT1、TNF和VCTM1等，这些靶点已经被证实在DN与DR的病理过程中起到重要作用:病同治”这一中医理论的科学性，验证了吕仁和教授的临床经验，为中药的临床应用与开发提供了一VEGFA水平下降可能导致HIF1A升高，进而导致DN定的研究方向。肾纤维化，使肾小球滤过率下降[37]，而且调节VEGFA能够抑制新血管生成和血管通透性增加进而缓解DR进程[29];降低TNF-α的表达水平，能够抑制DN患者的微炎症反应，改善肾功能[38]，调节TNF表达能够降低DR患者视网膜血管通透性增高和血管内皮细胞增殖。而且这些关键靶点在肾脏、视网膜和[39]胰岛中都有高表达，富集得到的相关通路也对DN、参考文献:[1]SAEEDIP，PETERSOHNI，SALPEAP，etal.Globalandregionaldiabetesprevalenceestimatesfor2019andprojectionsfor2030and2045:resultsfromtheinternationaldiabetesfederationdiabetesatlas，9thedition[J].DiabetesResearchandClinicalPractice，2019，157(11):107843.[2]KATOM，NATARAJANR.Epigeneticsandepigenomicsindiabetickidneydiseaseandmetabolicmemory[J].NatureDR的治疗意义重大。这些网络药理学分析结果都ReviewsNephrology，2019，15(6):327-345.从多方面验证了“异病同治”方法在临床应用中的[3]中华医学会糖尿病学分会视网膜病变学组.糖尿病视准确性和可靠性，两种不同的疾病在分子水平、细网膜病变防治专家共识[J].中华糖尿病杂志，2018，4(4):胞水平和组织器官水平的关联都得到了解析，由此241-247.可见“异病同治”理论的科学性以及这种方法广泛应用于临床的可行性。3.5前景与展望本研究利用网络药理学的方法380RetinopathyGroupofDiabetesBranchofChineseMedicalAssociation.Expertconsensusonpreventionandtreatmentofdiabeticretinopathy[J].ChineseJournalofDiabetes，2018，第40卷第3期2021年6月4(4):241-247.JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine天津中医药大学学报Vol.40No.3Jun.2021MAL，SHAOMY，SUNQB，etal.ThemechanismofDanqi[4]刘玉栋，孟祥云，程涛，等.糖尿病肾病中西医发病机制Tabletsinthetreatmentofcoronaryheartdiseasebasedon及治疗概述[J].西部中医药，2019，32(7):134-138.networkpharmacology[J].ActaPharmaceuticaSinica，2020，LIUYD，MENGXY，CHENGT，etal.Therapeuticoverview55(12):2942-2950.andthepathogenesisofdiabeticnephropathyfromintegra鄄[13]王永华，李燕.系统药理学[M].大连:大连理工出版社，tivemedicine[J].WesternJournalofTraditionalChinese2016.Medicine，2019，32(7):134-138.WANGYH，LIY.Systemspharmacology[M].Dalian:Dalian[5]陈丹丹，帅天姣，李娟，等.糖尿病视网膜病变微血管神InstituteofTechnologyPress，2016.经病变发病机制的研究进展[J].国际眼科杂志，2018，18[14]WANGJX，ZHONGJC，CHENG，etal.ClusterViz:a(5):844-846.CytoscapeAPPforclusteranalysisofbiologicalnetwork[J].CHENDD，SHUAITJ，LIJ，etal.ResearchprogressonACM，2015，12(4):852-855.thepathogenesisofmicrovascularneuropathyindiabetic[15]MLECNIKB，GALONJ，BINDEAG.Comprehensivefunc鄄retinopathy[J].InternationalEyeScience，2018，18(5):844-tionalanalysisoflargelistsofgenesandproteins[J].Journal846.ofproteomics，2018，171(11):2-10.[6]ASGHARZADEHM，GHORGHANLUS，RASHEDIJ，etal.[16]应巧，何斐，张伟，等.基于TLR4/JNK信号通路探讨木犀Associationofpromoterpolymorphismsofinterleukin鄄10草素对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用[J].中国andinterferon鄄gammageneswithtuberculosisinazeri药师，2020，23(6):1064-1068.populationofiran[J].IranianJournalofAllergyAsthmaandYINGQ，HEF，ZHANGW，etal.ImprovementofluteolinImmunology，2016，15(3):167-173.oninsulinresistanceintype2diabeticratsbasedonTLR4/[7]GRUNWALDJE，ALEXANDERJ，MAGUIREM，etal.JNKsignalingpathway[J].ChinaPharmacist，2020，23(6):Prevalenceofocularfunduspathologyinpatientswith1064-1068.chronickidneydisease[J].ClinicalJournaloftheAmerican[17]邓向涛，郝海军，陈晓峰，等.木犀草素2种固体分散体SocietyofNephrology，2010，5(5):867-873.制备、表征和大鼠体内药动学行为研究[J].中草药，2018，[8]赵进喜，肖永华.吕仁和临床经验集[M].北京:人民军医49(24):5787-5793.出版社，2009.DENGXD，H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