HPLC法检测晚期糖化产物 前体物质的柱前衍生化条件优化
【摘要】 目的HPLC-柱前衍生化法测定晚期糖化产物的前体物质α-二羰基类化合物的最优衍生化条件。方法采用紫外分光光度法检测α-二羰基类化合物标准品衍生化后的最大吸收波长。运用单因素试验，以HPLC-柱前衍生化法所检测出的峰面积作为评价指标，对衍生化反应的影响因素--pH值、温度、加热时间、物质的量的比例进行优化。结果2,3-戊二酮、甲基乙二醛、2,3-丁二酮、乙二醛用衍生化试剂4-硝基-1,2-苯二胺（NPDA）衍生化产物的紫外吸收最大波长约是260nm。2,3-戊二酮最佳衍生条件是pH值为3、40℃、加热20min、衍生化试剂与其物质的量比例为1:1;甲基乙二醛最佳衍生条件是pH值为3、60℃、加热20min、物质的量比例为8∶1;2,3-丁二酮最佳衍生条件是pH值为5、40℃、加热30min、物质的量的比例为1∶1;乙二醛最佳衍生条件是pH值为9、40℃、加热30min、物质的量的比例为10∶1。并考察方法的线性范围和衍生物的稳定性。结论本次研究说明NPDA可在温和的反应条件下，短
