超声纳滤及多酶水解集成制备酵母高F值寡肽

【摘要】 构建一种根据原料特点步步可控且有放大前景的集成工艺路线制备高F值酵母寡肽。以活性干酵母为初始原料,超声破碎匀浆后从几种常见蛋白酶中筛选出酵母抽提酶;利用纳滤浓缩粗肽并去除其中少量游离氨基酸,最后采用a-胰凝乳蛋白酶和羧肽酶A双酶依次定向酶解,使酵母粗肽中的多肽不仅能水解为分子量更小的寡肽且能使肽中的芳香族氨基酸大量游离出来,而通过选择性吸附除去游离的芳香族氨基酸而获得高F值寡肽。结果表明:碱性蛋干酵母、pH8.0、白酶作为酵母抽提酶来获取酵母蛋白,抽提酵母细胞条件为料液比1:6、温度50加酶量1000酶解时间6h;纳滤操作条件为采用500Da纳滤膜在0_3MPa下浓缩液体积降为原来的1/3;对a-胰凝乳蛋白酶和羧肽酶A这两种酶进行单因素实验,获得胰凝乳蛋白酶最佳酶解条件:加酶量6000U_g-1酵母粗肽、温度40T、pH8.0、时间4h;羧肽酶A最佳酶解条件:加酶量4U.mL-1酵母粗肽、温度40T、酶解pH7.5、时间4h;活