应用CE-LIF方法分析重组人1型单纯疱疹病毒的DNA限制酶酶切片段
【摘要】 目的:建立毛细管电泳-激光诱导荧光（CE-LIF）检测方法，对重组人1型单纯疱疹病毒（rHSV-1）的DNA限制性酶切片段进行分析。方法:以rHSV-1为研究对象，用核酸提取仪提取其DNA，以DNA限制性内切酶NdeⅠ酶切，以SYBRTMGoldnucleicacid作为荧光标记物，利用CE-LIF实现分离检测，通过DNAladder计算片段大小。CE-LIF条件:采用涂层毛细管（有效长度30cm，总长度40cm，内径100µm），3.45kPa压力进样3s;毛细管分离温度设为25℃，毛细管分离电压为-7kV，分离时间40min;LIF检测器的激发波长及发射波长分别为488nm和520nm。结果:新建方法可以对8个目标酶切片段分离检测，各片段峰迁移时间的RSD（n=6）均小于0.35%，片段峰1~7校正峰面积百分比的RSD（n=6）均小于5.6%，方法精密度良好。通过DNAladder回归方程，对DNA酶切产物进行片段大小的计算，各片段大小计算结果RSD（
